ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN NHANH CHỒI IN VITRO CÂY SÂM CA

Cây Sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn.) thuộc họ Thuỷ tiên (Amaryllideaceae) là cây dược liệu với đặc tính chống ung thư có nguy cơ tuyệt chủng. Do đó, vấn đề bảo tồn loài này rất cần thiết. Ở đây chúng tôi trình bày kết quả ảnh hưởng của 6-benzyl adenine (BA), Kinetin (Kn), BA + Kn đến khả năng nhân nhanh chồi in vitro cây Sâm cau từ chồi
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN NHANH CHỒI IN VITRO CÂY SÂM CA Tuyển tập Báo cáo Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học lần thứ 7 Đại học Đà Nẵng năm 2010 ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN NHANH CHỒI IN VITRO CÂY SÂM CAU (CURCULIGO ORCHIOIDES GAERTN) THE EFFECT OF PHYTOHORMONE ON MULTIPLE SHOOTS IN VITRO OF CURCULIGO ORCHIOIDES GAERTN SVTH: Nguyễn Thị Út, Nguyễn Thị Xuân Tâm, Từ Thị Tú Lớp 06CSM, Trường Đại học Sư phạm GVHD: Võ Châu Tuấn Khoa Sinh – Môi trường, Trường Đại học Sư phạm TÓM TẮT Cây Sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn.) thuộc họ Thuỷ tiên (Amaryllideaceae) là câydược liệu với đặc tính chống ung thư có nguy cơ tuyệt chủng. Do đó, vấn đề bảo tồn loài này rấtcần thiết. Ở đây chúng tôi trình bày kết quả ảnh hưởng của 6-benzyl adenine (BA), Kinetin (Kn),BA + Kn đến khả năng nhân nhanh chồi in vitro cây Sâm cau từ chồi đỉnh. Số chồi phát sinh caonhất trên môi trường MS bổ sung tổ hợp 1.0 mg/l BA + Kn. ABSTRACT Curculigo orchioides Gaertn is an endangered medicinal plant with anticancer propertiesbelonging to Amaryllideaceae. Therefore, the need for conservation of this plant is crucial. Here, wedescribe effect of 6-benzyl adenine (BA), Kinetin (Kn), BA + Kn on the multiple shoot in vitro of C.orchioides from shoot tip explant Maximum number of shoot buds induction on MS mediumsupplemented with BA + KN (each at 1.0 mg/l).1. Mở đầu Ngành Công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật ra đời hằng năm mang lại lợi ích lớncho nhiều nước trên thế giới. Bên cạnh việc khắc phục nhược điểm của biện pháp nhângiống truyền thống, nó còn thể hiện ưu điểm vượt trội: tạo ra lượng lớn cây giống sạchbệnh, đồng nhất về mặt di truyền trong thời gian ngắn; tạo sinh khối tế bào làm nguyên liệucho công nghiệp và y dược. Cây Sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn) là loài dược thảo quý hiếm. Theo yhọc cổ truyền Ấn Độ và cục dược lí Trung Quốc, rễ cây Sâm cau có tác dụng trị một sốbệnh như ung thư, vàng da, hen suyễn, bồi bổ cho phụ nữ sau khi sinh, người già… Dokhai thác quá mức và không kiểm soát nên Sâm cau có nguy cơ tuyệt chủng. Trong bài báocáo này, chúng tôi tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng của chất kích thích sinh trưởng đến khảnăng nhân nhanh chồi in vitro cây Sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn ) nhằm tìm ramôi trường nuôi cấy tối ưu cho việc nhân nhanh chồi in vitro làm cơ sở cho xây dựng quytrình nhân nhanh loài cây dược liệu quý này.2. Nội dung2.1. Vật liệu và phương pháp2.1.1. Vật liệu Chồi đỉnh của cây Sâm cau ngoài tự nhiên và đỉnh sinh trưởng của chồi in vitro sau 523 Tuyển tập Báo cáo Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học lần thứ 7 Đại học Đà Nẵng năm 20108 tuần tái sinh.2.1.2. Phương pháp Chồi đỉnh của cây Sâm cau nuôi cấy trên môi trường MS bổ sung BA (1 - 4 mg/l) Đỉnh sinh trưởng của chồi in vitro nuôi cấy trên môi trường MS bổ sung BA (0.5 -4 mg/l), Kn (0.5 - 4 mg/l), BA + Kn (0.5 - 4 mg/l). Các mẫu cấy được nuôi trong môi trường MS bổ sung 30 g/l đường Sacarose, agar8.0 g/l, than hoạt tính 1.0 g/l, pH = 5.8, điều kiện ánh sáng 2000 - 2500 lux, nhiệt độ 25 ±20C.2.2. Kết quả và thảo luận2.2.1. Ảnh hưởng của BA đến khả năng tái sinh chồi in vitro Chồi đỉnh sau thời gian 8 tuần nuôi cấy, kết quả được trình bày ở bảng 2.1 Bảng 2.1. Ảnh hưởng của BA đến khả năng tái sinh chồi in vitro Tỷ lệ mẫu bật chồi không Số chồi/mẫu cấy Chiều cao chồi (cm) BA (mg/l) nhiễm(%) 1,0 83,33 1,00 ± 0,00 3,90 ± 0,18 1,5 66,67 1,00 ± 0,00 4,36 ± 0,12 2,0 50,00 1,00 ± 0,00 4,86 ± 0,08 2,5 83,33 1,00 ± 0,00 4,98 ± 0,18 3,0 83,33 1,00 ± 0,00 5,13 ± 0,35 3,5 50,00 1,00 ± 0,00 5,20 ± 0,23 4,0 100,00 1,50 ± 0,28 5,50 ± 0,14 2 1 Hình 2.1. Ảnh chồi Sâm cau trên môi trường tái sinh 1: Mẫu bắt đầu nuôi cấy trên môi trường tái sinh 2: Chồi In vitro sau 8 tuần nuôi cấy Kết quả nghiên cứu cho thấy trên môi trường MS bổ sung BA 4.0 mg/l là tốt nhấtcho tái sinh chồi in vitro. Số chồi đạt được là 1.50 chồi/mẫu cấy với chiều cao trung bìnhđạt 5.50 cm. Theo nghiên cứu của Purohit (1994), phần lớn các loài cây thuộc họ Thuỷ tiêncó khả năng tái sinh chồi tốt trên môi trường bổ sung BA ở nồng độ cao. 524 Tuyển tập Báo cáo Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học lần thứ 7 Đại học Đà Nẵng năm 20102.2.2. Ảnh hưởng của BA, Kn, BA + Kn đến khả năng nhân nhanh chồi in vitro cây Sâmcau. Đỉnh sinh trưởng dài 1 cm, tách từ môi trường tái sinh tốt nhất được chuyển sangmôi trường nhân nhanh sau thời gian 8 tuần nuôi cấy. Kết quả được trình bày ở bảng 2.2 Bảng 2.2. Ảnh hưởng của BA, Kn, BA + Kn đến khả năng nhân nhanh chồi in vitro cây Sâm cau sau 8 tuần nuôi cấy. Chất kích Số chồi/mẫu cấy Chiều cao chồi (cm) thích sinh trưởng (mg/l) BA 0,5 5,00 ± 0,41 2,58 ± 0,50 ...