Bài giảng Thực hành Vi sinh vật đại cương (Chương trình POHE)

Bài giảng Thực hành Vi sinh vật đại cương (Chương trình POHE) cung cấp cho người học những kiến thức như: Phương pháp làm tiêu bản cố định và nhuộm màu gram; quan sát hình thái vi sinh vật; phương pháp làm môi trường; nuôi cấy vi sinh vật; đánh giá sinh trưởng của vi sinh vật trên các môi trường nuôi cấy; các phương pháp đếm số lượng tế bào vi sinh vật. Mời các bạn cùng tham khảo!
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bài giảng Thực hành Vi sinh vật đại cương (Chương trình POHE) 10/21/2018 Bài 1: PHƯƠNG PHÁP LÀM TIÊU BẢN SOI TƯƠI THỰC HÀNH NỘI DUNG: 1. Phương pháp làm tiêu bản soi tươi 2. Quan sát tiêu bản nấm mốc Vi sinh vật đại cương MỤC ĐÍCH: (Chương trình POHE) Làm quen với cấu tạo kính hiển vi quang học. Nắm được cách sử dụng Học cách làm tiêu bản soi tươi (không nhuộm) Quan sát tiêu bản nấm mốc II. Phương pháp làm tiêu bản soi tươi NỘI DUNG - Tiêu bản soi tươi: Lấy trực tiếp mẫu đặt lên phiến kính để quan sát, không cần nhuộm màu.BÀI 1. PHƯƠNG PHÁP LÀM TIÊU BẢN CỐ ĐỊNH VÀ - Tiêu bản này không thể bảo quản lâu dài NHUỘM MÀU GRAM - Thực hành:BÀI 2. QUAN SÁT HÌNH THÁI VI SINH VẬT + Phương pháp làm tiêu bản giọt ép (quan sát nấm men) + Phương pháp làm tiêu bản nấm mốcBÀI 3. PHƯƠNG PHÁP LÀM MÔI TRƯỜNG 2.1. Các bước chuẩn bị:BÀI 4. NUÔI CẤY VI SINH VẬT - Mẫu vi sinh vật cần quan sát:BÀI 5. ĐÁNH GIÁ SINH TRƯỞNG CỦA VSV TRÊN CÁC + Mẫu lỏng: Dung dịch nuôi cấy nấm men Saccharomyces sp.MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY + Mẫu rắn: Đĩa nuôi cấy nấm mốc: Aspergillus sp., Rhizopus/Niger, PenicilliumBÀI 6. CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐẾM SỐ LƯỢNG TB VSV - Các dụng cụ khác: Lam kính, que cấy, ống hút Pasteur, đèn cồn, bút viết kính, panh kẹp, lamen, dao cắt mẫu … - Dung dịch soi tươi: Dung dịch phenol 10/21/2018 2.2. Phương pháp làm tiêu bản giọt ép Bước 1: Tiệt trùng lam kính bằng cách hơ lam kính trên ngọn lửa đèn cồn vài lần. Sau đó, ghi tên mẫu lên tiêu bản Bước 2: Sử dụng ống hút Pasteur lấy một giọt mẫu, đặt lên lam kính  nhỏ 1 giọt phenol  trộn đều. Bước 3: Đặt lamen nghiêng 1 góc 45o, từ từ đậy lamen xuống sao cho lamen phủ kín giọt dung dịch mẫu và không có bọt khí. Bước 4: Quan sát dưới kính hiển vi với vật kính 40x2.3. Phương pháp làm tiêu bản nấm mốc (soi tươi)Bước 1: Tiệt trùng lam kính bằng cách hơ lam kính trên ngọn lửa đèn cồn vài lần.Sau đó, ghi tên mẫu lên tiêu bảnBước 2: Sử dụng que cấy đầu nhọn hoặc dao cắt mẫu cắt một phần thạch có chứamẫu  đặt lên lam kínhBước 3: Quan sát dưới kính hiển vi với vật kính 4x và 10x 10/21/2018 Yêu cầu báo cáo thực hành I. Phương pháp làm tiêu bản cố định - Tiêu bản cố định được nhuộm màu dùng để nghiên cứu các đặc điểm hình thái 1. Quan sát tiêu bản làm sẵn học vsv, kiểm tra độ thuần khiết của giống… + Tiêu bản nấm mốc (vật kính 4x, 10x) - Tiêu bản này có thể bảo quản lâu dài 2. Quan sát tiêu bản tự làm - VSV quan sát được giết chết trong quá trình xử lý  an toàn cho người quan sát 1.1. Các bước chuẩn bị: + Tiêu bản nấm men với vật kính 40x - Chuẩn bị mẫu vật gồm: + Tiêu bản nấm mốc với vật kính 4 và 10x + Mẫu lỏng: dung dịch nuôi cấy vi khuẩn lactic 3. Mô tả hình thái (yêu cầu vẽ hình) + Mẫu rắn: 01 ống thạch nghiêng nuôi cấy TB nấm men  Hình thái: Cho biết hình thái của nấm men và nấm mốc - Chuẩn bị dụng cụ gồm que cấy, đèn cồn, nước cất vô trùng, bút viết kính, lam  Đặc điểm sinh sản (nấm men, nấm mốc): nảy chồi ?, hình thành bào tử gì? kính sạch - Chuẩn bị lam kính: + chọn lam kính sạch, hơ qua lại trên ngọn lửa đèn cồn để làm sạch. + Sử dụng bút viết kính ghi ký hiệu mẫu tiêu bản cần nhuộm 1.2. Các bước làm tiêu bản cố địnhBài 2: PHƯƠNG PHÁP LÀM TIÊU BẢN CỐ ĐỊNH VÀ NHUỘM MÀU GRAM Bước 1: Chuẩn bị vết bôi: Lấy lam kính đã tiệt trùng; sử dụng bút viết kính vẽ lên một vòng tròn  định vị vùng làm vết bôi. Bước 2: Làm vết bôi NỘI DUNG: + Đối với mẫu lỏng: Sử dụng que ...