Báo cáo KÍCH THƯỚC CỦA QUẦN THỂ NANG NGUY ÊN THUỶ VÀ PHẢN ỨNG TRẢ LỜI SỰ KÍCH THÍCH GÂY RỤNG NHIỀU TRỨNG Ở TRÂU VÀ BÒ

Ưu thế của việc tạo phôi bằng ph ương pháp gây rụng nhiều trứng thể hiện ở đặc tính là các phôi này có s ức sống gần giống như phôi do rụng trứng tự nhiên: trong điều kiện cấy phôi tươi đồng pha, tỷ lệ cấy phôi đạt gần với tỷ lệ thụ tinh nhân tạo (xấp xỉ 70%); phôi thu được do gây rụng nhiều trứng cũng có khả năng sống t ương tự như phôi thu được do rụng trứng tự nhiên sau khi đông lạnh và giải đông. ...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Báo cáo " KÍCH THƯỚC CỦA QUẦN THỂ NANG NGUY ÊN THUỶ VÀ PHẢN ỨNG TRẢ LỜI SỰ KÍCH THÍCH GÂY RỤNG NHIỀU TRỨNG Ở TRÂU VÀ BÒ " 327Phần IV: CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĐỘNG VẬT KÍCH THƯỚC CỦA QUẦN THỂ NANG NGUY ÊN THU Ỷ VÀ PHẢN ỨNG TRẢ LỜI SỰ KÍCH THÍCH GÂY RỤNG NHIỀU TRỨNG Ở TRÂU V À BÒ Hoàng Ngh ĩa Sơn, Viện Sinh học Nhiệt đới Lê Văn Ty , Viện Công nghệ Sinh học Nguyễn Mộng H ùng, ĐHKHTN, Hà NộiMỞ ĐẦU Ưu thế của việc tạo phôi bằng ph ương pháp gây rụng nhiều trứng thể hiện ở đặctính là các phôi này có s ức sống gần giống như phôi do rụng trứng tự nhiên: trong điềukiện cấy phôi tươi đồng pha, tỷ lệ cấy phôi đạt gần với tỷ lệ thụ tinh nhân tạo (xấp xỉ70%); phôi thu được do gây rụng nhiều trứng cũng có khả năng sống t ương tự như phôithu được do rụng trứng tự nhiên sau khi đông lạnh và giải đông. Nếu đối với b ò, việctạo phôi bằng gây rụng nhiều trứng có thể đáp ứng đ ược các chương trình cải tạo giốngbằng cấy phôi th ì ở trâu, câu trả lời vẫn c òn để ngỏ. Việc phát hiện các sóng nang trong chu kỳ sinh dục của trâu v à của bò cho phépngười ta rút ngắn khoảng cách tái sử dụng động vật cho việc gây rụng nhiều trứng v àthu phôi. Điều này đã được chứng minh rất hữu ích tr ên bò. Cùng có quy lu ật phát triểnnang ki ểu sóng như bò nhưng hiệu quả của việc gây rụng nhiều trứng ở trâu vẫn ch ưađược khẳng định. Điều gì tạo cho trâu các khác biệt nh ư vậy? Ở các công tr ình trước, khi so sánhquần thể nang, chúng tôi thấy rằng trâu có số nang có xoang chỉ bằng 20% so với b ò [1].Ngoài ra, ở bò, người ta phát hiện thấy về mặt số l ượng quần thể nang có xoang tỷ lệthuận với quần thể nang nguy ên thu ỷ [2]. Tuy nhi ên, theo l ứa tuổi, quần thể nangnguyên thu ỷ của buồng trứng có biến động rất lớn, hiệu ứng tuổi có thể l àm lu m ờ hiệuứng cá thể hoặc hiệu ứng lo ài. Việc nghi ên cứu quần thể nang nguy ên thu ỷ của buồngtrứng trâu v à bò ở giai đoạn phát triển b ào thai (t ừ 2 tháng đến 9 tháng tuổi), giai đoạnsớm nhất của quá tr ình hình thành và phát tri ển, một mặt xoá đi khoảng trống tr ong hiểubiết của chúng ta về quần thể nang của trâu giai đoạn n ày, m ặt khác, so sánh về mặtđịnh lượng, sẽ l à hữu ích cho việc t ìm ra nguyên nhân ph ản ứng thấp ở trâu trong việctrả lời các hooc - môn gây r ụng trứng.VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG P HÁP Buồng trứng củ a bào thai trâu và bào thai bò được thu một cách ngẫu nhi ên tại haitỉnh Phú Thọ v à Bắc Kạn328 Hội nghị KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ 2007 Buồng trứng được xử lý theo phương pháp nghiên cứu tổ chức học thông thường[4], được mô tả ngắn gọn như sau: sau th ời gian cố định, ít nhất l à 1 tháng, toàn b ộbuồng trứng được làm khô b ằng các nồng độ cồn tăng dần từ 400, 700, 900 rồi đến cồntuyệt đối, thời gian đối với mỗi nồng độ ít nhất l à trong 1 gi ờ. Từ đây buồng trứng đượcchuyển qua dung môi to -lu-en 2 lần, pa-ra-phin 50%, toluene + pa-ra-phin 80% r ồichuyển vào để đúc khối. Ở dạng n ày, buồng trứng có thể bảo quản đ ược lâu cho đến khitiến hành cắt mẫu. Cắt toàn bộ buồng trứng bằng máy cắt mẫu sao cho các lát cắt d ày 7μ? tạo thànhbăng liên tục. Các băng này được ủ ở 370C trong 2-4 ngày. C ứ 6 lát cắt li ên tục lại lấymột lát đưa lên lam kính, loại bỏ pa -ra-phin, nhu ộm bằng haemtoxylin và phân tích dướikính hi ển vi. Để xác định số nang nguy ên thu ỷ của các buồng trứng b ào của thai trâu v à bò, tiếnhành đếm số nang khi nh ìn thấy nhân của tế b ào trứng, cứ 60 lát cắt, lại tiến hành đếm 1lần, số nang nguy ên thu ỷ trong mỗi buồng trứng đ ược tính theo công thức: P = A x M/L + M Trong đó: P Số nang buồng trứng; A - Tổng số nang đếm được; M - Độ dày của látcắt; L - Đường kính của nhân tế b ào trứng Đối với mỗi buồng trứng, cần đếm lặp lại 2 lần; kết quả cuối c ùng là trung bìnhcộng của 2 lần đếm n ày. Bảng 1: Số mẫu buồng trứng của b ào thai trâu được phân tích tổ chức học Chiều dài của thân b ào thai (cm) Tuổi của b ào thai Số mầu (tháng) (n) 8-14 329Phần IV: CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĐỘNG VẬTKẾT QUẢ V À THẢO LUẬN Ở buồng trứng của b ào thai trâu, các d ấu hiệu phân b ào gi ảm phân chỉ bắt đầuquan sát được khi b ào thai b ắt đầu chuyển sang tháng phát triển thứ 3, thứ 4; tuy vậyphân bào nguyên phân ch ỉ ho àn toàn ng ừng v ào cu ối tháng thứ 6. Quần thể nangnguyên thu ỷ h ình thành chính vào giai đoạn n ày. Vào tháng th ứ 4, đ ã quan sát th ấyxu ất hiện các nang có xoang, tuy nhi ên có nhi ều nang chỉ chứa rất ít tế b ào nang vànhanh chóng thoái hoá. Nang có xoang xu ất hiện nhiều v à ...