Huyết học - truyền máu part 10

- Hoá học tế bào: Sử dụng 4 xét nghiệm nhuộm hoá học tế bào: Peroxydase, Sudan đen, PAS, Esteraza không đặc hiệu.2.2. Vật liệu nghiên cứu - Dịch hút tủy xương: làm tủy đồ, nhuộm hóa học tế bào đồng thời phân loại miễn dịch học - Máy đếm tế bào tự động - Kính hiển vi huznh quang hiệu Nikon - Ly tâm lạnh - Hóa chất + Bộ kit miễn dịch huznh quang sử dụng cho phân loại lơ xê mi cấp dòng lympho bao gồm: Anti-CD3, Anti-CD5, Anti-CD7, Anti-CD10, Anti-CD19 và bộ kít chứng + Các...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Huyết học - truyền máu part 10- Hoá học tế bào: Sử dụng 4 xét nghiệm nhuộm hoá học tế bào: Peroxydase,Sudan đen, PAS, Esteraza không đặc hiệu.2.2. Vật liệu nghiên cứu- Dịch hút tủy xương: làm tủy đồ, nhuộm hóa học tế bào đồng thời phân loại miễndịch học- Máy đếm tế bào tự động- Kính hiển vi huznh quang hiệu Nikon- Ly tâm lạnh- Hóa chất+ Bộ kit miễn dịch huznh quang sử dụng cho phân loại lơ xê mi cấp dòng lymphobao gồm: Anti-CD3, Anti-CD5, Anti-CD7, Anti-CD10, Anti-CD19 và bộ kít chứng+ Các hóa chất khác: đệm PBS, dung dịch phá hồng cầu, dung dịch cố định tế bào,ficoll…2.3. Phương pháp nghiên cứuSử dụng các phương pháp (hình thái học, hoá học tế bào) để phân loại lơ xê micấp theo tiêu chuẩn FAB và bổ sung các phương pháp như sau:- Phương pháp Miễn dịch: Sử dụng kháng thể đơn dòng (monoclonal antibodies)để phát hiện các dấu ấn (CD) đặc hiệu trên bề mặt tế bào (CD – Clutter ofDiffirentiation) [4].+ Tế bào gốc sinh máu : CD 34+ Tế bào định hướng dòng tuỷ : CD 13, CD33, CD34+ Tế bào định hướng dòng lympho : CD5, CD7,CD10, CD19, CD34+ Tế bào đầu dòng: - T Lympho: CD3, CD4, CD8, CD7, CD5 - Bạch cầu hạt : CD13, CD33 - B Lympho: CD19, CD20, CD10 - Bạch cầu mono : CD14 - Tế bào NK : CD15/56 - Tiểu cầu : CD61- Phương pháp Di truyền tế bào: Các bất thường NST: Sử dụng phương pháp nuôicấy lympho, làm tiêu bản NST, phân tích biến đổi NST.3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨUBằng việc phối hợp áp dụng các phương pháp phân loại lơ xê mi cấp theo phânloại FAB bổ sung, kết quả phân loại như sau:BẢNG 1. MÔ HÌNH PHÂN LOẠI LƠ XÊ MI CẤP Thể bệnh Lơ xê mi cấp Số lượng Tỷ l ệ %1. Lơ xê mi cấp tế bào chưa biệt hoá (Null-cells), các 12/306 3,9dấu ấn (-):2. Lơ xêmi cấp tế bào gốc sinh máu có CD34 +, các CD 24/306 7,8khác (-)3. Lơ xê mi cấp tế bào lai: 19/306 6,24. Lơ xê mi cấp tế bào gốc sinh máu biệt hoá Dòng 166/306 54,3tuỷ: CD13+, CD33+, CD34+:5. Lơ xê mi cấp tế bào gốc sinh máu biệt hoá Dòng 85/306 27,8lympho:NHẬN XÉT- Việc áp dụng đồng thời 4 phương pháp để chẩn đoán và phân loại bệnh lơ xêmi cấp đã phát hiện được những thể bệnh mới mà các phương pháp cổ điển khóphát hiện hoặc không phát hiện được, đó là: lơ xê mi tế bào gốc chưa biệt hóa, lơxê mi tế bào gốc sinh máu.- Ngoài ra việc áp dụng phương pháp miễn dịch học trong chẩn đoán và phân loạilơ xê mi cấp còn phát được các thể bệnh đặc biệt: lơ xê mi cấp tế bào lai: lai tủy-lympho B và lai tủy- lympho T.Bảng 2. Phân loại chi tiết lơ xê mi cấp dòng tủy, áp dụng phương pháp FAB và bổsung bằng phương pháp miễn dịch học: Thể bệnh lơ xê mi cấp Số lượng Tỷ l ệ % Lơ xê mi cấp tế bào nguồn sinh máu biệt hoá 166/306 54,3 dòng tuỷ: CD13+, CD33+, CD34+: - Mo: 11 6,6 - M1: 23 14,0 - M2: 44 26,5 - M3: M3V 26 15,7 - M4 25 15,1 - M5: M5a, M5b 27 16,3 - M6: 6 3,6 - M7: 4 2,4NHẬN XÉT- Việc áp dụng phương pháp miễn dịch học đã bổ sung tốt cho phân loại FAB trongviệc xác định các thể bệnh lơ xê mi cấp dòng tủy như thể Mo, thể M7. Phươngpháp Miễn dịch học cũng góp phần phân biệt chính xác giữa thể M4 và M5 bằngviệc sử dụng marker CD14.Bảng 3. Phân loại chi tiết lơ xê mi cấp dòng lympho, áp dụng phương pháp FAB vàbổ sung bằng phương pháp miễn dịch học:Thể bệnh lơ xê mi cấp Số lượng T ỷ lệ %Lơ xê mi cấp tế bào gốc sinh máu biệt hoá dòng 85/306 27,8lympho a. Theo nguồn gốc tế bào: - T lympho 23 27,1 + Tiền T (CD7+, CD34+, CD19-) 17 73,9 + T chín (CD3+, CD7+, CD19- ) 6 26,1 - B lympho 62 72,9 + B sớm (CD10+, CD34+, CD19±) 9 14,5 + Tiền B (CD10+, CD19+) 28 45,2 + B chín (CD19+) 25 40,3 b. Theo hình thái tế bào: có 3 thể L1 14 16,4 L2 69 81,2 L3 2 2,4NHẬN XÉT- Phương pháp phân loại miễn dịch học đã góp phần phân loại chi t ...