Luận văn Thạc sĩ Hóa học: Xây dựng quy trình thực nghiệm phân tích độc tố Ciguatoxins trong Chình biển bằng phương pháp sắc ký lỏng đầu dò khối phổ kép (LC/MS-MS)

Mục tiêu của đề tài là dựa trên quy trình phân tích Ciguatoxins của Nhật Bản, tiến hành hiệu chỉnh để xây dựng được một quy trình thực nghiệm vừa phù hợp với điều kiện trang thiết bị tại Việt Nam vừa phù hợp với thành phần hóa sinh của Chình biển để đảm bảo độ tin cậy và tính chính xác của kết quả phân tích.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn Thạc sĩ Hóa học: Xây dựng quy trình thực nghiệm phân tích độc tố Ciguatoxins trong Chình biển bằng phương pháp sắc ký lỏng đầu dò khối phổ kép (LC/MS-MS) Lời cam đoan Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các sốliệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa từng được ai công bốtrong bất kỳ công trình nào khác. Nha Trang, ngày 04 tháng 10 năm 2019 Tác giả luận văn Nguyễn Phương Nga LỜI CẢM ƠN Để luận văn này đạt kết quả tốt đẹp, tôi đã nhận được rất nhiều sự giúpđỡ quý báu của các thầy cô giáo, các nhà khoa học thuộc nhiều lĩnh vực cùngđồng nghiệp và bạn bè. Đầu tiên tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS. Đào Việt Hà và TS.Phạm Đức Thịnh đã tận tình hướng dẫn, quan tâm và tạo điều kiện cho tôihoàn thành bản luận văn này. Tôi chân thành cảm ơn đề tài Nghiên cứu độc tố của một số loài cá rạnvà thân mềm có nguy cơ gây ngộ độc thực phẩm tại Việt Nam (mã số:KHCBBI.02/18-20) của Viện Hải dương học đã hỗ trợ kinh phí cho việc thựchiện Luận văn. Tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Hóa Học, Học việnKhoa học và Công nghệ, Phòng Quản lý Tổng hợp đã tạo mọi điều kiện thuậnlợi giúp tôi thực hiện luận văn và hoàn thành mọi thủ tục cần thiết. Tôi chân thành cảm ơn sự giúp đỡ và tạo điều kiện về mọi mặt củaLãnh đạo Viện Hải dương học cũng như các anh chị em trong phòng Hóasinh trong quá trình thực hiện luận văn. Cuối cùng, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình, người thânvà bạn bè đã luôn quan tâm, động viên và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình họctập và hoàn thành luận văn. Nha Trang, ngày 04 tháng 10 năm 2019 Tác giả luận văn Nguyễn Phương Nga Danh mục các ký hiệu và chữ viết tắtAcOH : AcetoneACN : AcetonitrilATTP : An toàn thực phẩmAPCI : Atmospheric pressure chemical ionizationCFP : Ciguatera Fish PoisoningCTX : CiguatoxinCTXs : CiguatoxinsDW : Distilled waterđvdt : Đơn vị diện tíchESI : Electrospray ionizationEI : Electron ionizationFAB : Fast-atom bombardmentHR-FABMS : High-resolution fast atom bombardment mass spectrometryH-NMR : Proton NMR spectroscopyCOSY : Correlated SpectroscopyGC : Gas chromatographyHPLC : High-performance liquid chromatographyHRMS : High Resolution Mass SpectrometryIP : Identification pointIS : Ion sprayLC : Liquid ChromatographyLOD : Limit of DetectionLOQ : Limit of QuantitationMeOH : MetanolMeCN : AcetonitrileMRM : Multi Reaction MonitoringMS : Mass spectrometryNĐTPB : Ngộ độc thực phẩm biểnPTN : Phòng thí nghiệmRF : Radio frequencySIM : Selected Ion MonitoringSPE : solid phase extractionSRM : Selected Reaction MonitoringTFA : Trifluoroacetic acidTEM : Temperature Danh mục các bảngBảng 1.1. Các độc tố ciguatoxins và ion phân tử tương ứng phân tích bằngsắc ký khối phổ………………………………………………...……………17Bảng 2.1. Định danh và ký hiệu mẫu..............................................................25Bảng 3.1. Ảnh hưởng của các điều kiện chiết rút đối với dịch chiết........…..36Bảng 3.2. Thời gian lưu của mẫu trong phép phân tích với pha tĩnh làAgillent……………..………………………………………………….……41Bảng 3.3. Thời gian lưu của mẫu trong phép phân tích với pha tĩnh làWakosil………………………………………………………………………43Bảng 3.4. Đánh giá độ thích hợp hệ thống trên cột Agilent Poroshell 120 EC-C18 (100 × 2,1 mm; 1,9 mm kích cỡ hạt nhồi)……………………………...45Bảng 3.5. Hàm lượng CTXs trong các mẫu Chình biển ở Việt Nam và NhậtBản………………………………………………………………………...…48Bảng 3.6. Kết quả so sánh phương sai các mẫu cơ tại Việt Nam và NhậtBản…………………………………………………………………………...50Bảng 3.7. Kết quả so sánh phương sai các mẫu gan tại Việt Nam và NhậtBản…………………………………………………………………………...50Bảng 3.8. Kết quả kiểm định sự khác biệt ở các mẫu cơ tại Việt Nam và NhậtBản………………………………………………………………………….. 51Bảng 3.9. Kết quả kiểm định sự khác biệt ở các mẫu gan tại Việt Nam vàNhật Bản……………………………...………………………………. …….52 Danh mục các hình vẽ, đồ thịHình 1.1. Một số cấu trúc của Ciguatoxin từ G. toxicus…………...……….10Hình 1.2. Cấu trúc Pacific (P-CTX-1) và Caribbean (C-CTX-1)ciguatoxin…………………………………………………………………....11Hình 1.3. Mô phỏng chuỗi thức ăn biển…………………………………… 12Hình 1.4. Mô hình hệ thống LC-MS......................................................... ...