Cấy mô nhân sinh giống Cymbidium trên môi trường đặc

Vật liệu cấy : Các chồi Cymbidium mới mọc từ giả hành được trồng lại trên môi trường ẩm, dùng dao nhỏ cắt bỏ rễ, lá vảy mô chết. Dùng xà bông và nước chải nhẹ các hành và bỏ đi các vảy bao phủ chồi đã khô trước. Kế đó nhúng mô vào cồn vài giây và khử trùng trong một dung dịch Hipoclorit canxi với nồng độ 60g/1ít trong 20 phút. Cuối cùng mô được nhúng vào nước cất khử trùng và phơi khô với giấy lọc. ...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Cấy mô nhân sinh giống Cymbidium trên môi trường đặcKỹ thuật nuôi trồng lan/Cấy mô nhân sinh giống Cymbidium trên môi trường đặc + Vật liệu cấy : Các chồi Cymbidium mới mọc từ giả hành được trồng lại trên môitrường ẩm, dùng dao nhỏ cắt bỏ rễ, lá vảy mô chết. Dùng xà bông và nướcchải nhẹ các hành và bỏ đi các vảy bao phủ chồi đã khô trước. Kế đó nhúngmô vào cồn vài giây và khử trùng trong một dung dịch Hipoclorit canxi vớinồng độ 60g/1ít trong 20 phút. Cuối c ùng mô được nhúng vào nước cất khửtrùng và phơi khô với giấy lọc. Việc cắt mô phân sinh được thực hiện dưới một kính lúp ở trong mộtphòng trống trải : Kích thước mô cấy khoảng 1 mm2 Mô phân sinh được lấyra bằng 4 vết cắt thẳng góc chung quanh mầm lá và một vết cắt ở ngay bêntrái bằng một lỡi lam đã được khử trùng bằng cồn và rửa lại bằng nước cất vô trùng. Đặt mô cấy lên bề mặt môi trườngđựng trong ống nghiệm, trong một tủ cấy vô trùng, tất cả các động tác đượctiến hành trên ngọn đèn cồn. Cuối cùng dùng bông gòn thấm nước nhét chặtmiệng ống nghiệm để tránh sự nhiễm nấm. + Điều kiện nuôi cấy : - Môi trờng Knudson C. - ph môi trường là 5,2. - ánh sáng 1.O00lm/m2. - Quang kỳ 14 giờ. - Nhiệt độ 21 0C. - ống nghiệm. + Quan sát và kết quả : Mô cấy không có gì biến đổi được 2 hoặc 3 tuần lễ, sau đó mô cấy bắtđầu to và trở nên xanh và thường cần 2 tháng mới có được các plbs, với cácrễ giả dài đến vài milimét nếu mô cấy quá bé phải mất từ 3 - 4 tháng. Khithấy lá đầu tiên dưới dạng một vảy nhỏ, lấy plbs ra, đặt trên một đia pê tri vôtrùng, cất thành 4 hoặc 6 miếng ngay qua trục giữa. Cấy chuyền các mảnhcắt này trở lại môi trường Knudson C nhưng có pha thêm nước chiết thựcvật không quá 10% thể tích môi trường. Mặt cắt lành lại rất nhanh và chỉ sau1 tháng trở thành một plbs mới sẵn sàng được cắt. -+ Kết luận : - Mô cấy không được bé hơn 1mm2, vì như thế sự hình thành plbs rấtchậm. Môi trường cấy chuyền có thêm chất chiết thực vật sẽ giúp plbs hìnhthành nhanh hơn môi trường không có chất chiết. Tuy nhiên không nên s ửdụng quá 10% thể tích môi trường và không nên dùng ở lần cấy đầu tiên.