ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA GIỐNG LAN RỪNG DENDROBIUM THU THẬP TẠI TỈNH BÌNH PHƢỚC VÀ THỊ XÃ BẢO LỘC (TỈNH LÂM ĐỒNG) BẰNG KỸ THUẬT RAPD

Hoa lan là một món quà của tạo hóa, nó không chỉ là một loài hoa đẹp có giá trị về mặt tinh thần mà còn có giá trị kinh tế cao và hiện đang có thị trường tiêu thụ mạnh trong nước cũng như xuất khẩu. Ngày nay, chúng ta có thể thấy hoa lan ở khắp mọi nơi và dễ bị choáng ngợp trước vẻ đẹp quyến rũ, biến hóa muôn màu, muôn vẻ của các loài hoa như: Cattleya, Hồ Điệp, Dendrobium, Vanda, Cymbidium. Hoa lan được ưa chuộng phải chăng bởi đó là biểu tượng của...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA GIỐNG LAN RỪNG DENDROBIUM THU THẬP TẠI TỈNH BÌNH PHƢỚC VÀ THỊ XÃ BẢO LỘC (TỈNH LÂM ĐỒNG) BẰNG KỸ THUẬT RAPD BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆPĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA GIỐNG LAN RỪNG DENDROBIUM THU THẬP TẠI TỈNH BÌNH PHƢỚC VÀ THỊ XÃ BẢO LỘC (TỈNH LÂM ĐỒNG) BẰNG KỸ THUẬT RAPD Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa: 2003 – 2007 Sinh viên thực hiện: LÊ TRẦN PHÚC KHOA Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2007 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC *************ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA GIỐNG LAN RỪNG DENDROBIUM THU THẬP TẠI TỈNH BÌNH PHƢỚC VÀ THỊ XÃ BẢO LỘC (TỈNH LÂM ĐỒNG) BẰNG KỸ THUẬT RAPD Giáo viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: TS. TRẦN THỊ DUNG LÊ TRẦN PHÚC KHOA TS. VÕ THÁI DÂN Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2007 LỜI CẢM TẠ Thành kính ghi nhớ công ơn ba mẹ cùng những người thân trong gia đình đãluôn tạo điều kiện và động viên con trong suốt quá trình học tập. Xin chân thành cảm tạ: Ban Giám Hiệu trường Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh đã tạo mọi điềukiện cho tôi trong suốt thời gian học tập tại trường. Các Thầy, Cô trong Bộ môn công nghệ sinh học cùng các thầy cô đã trựctiếp giảng dạy tôi trong suốt bốn năm qua. TS. Trần Thị Dung, TS. Võ Thái Dân, CN. Lưu Phúc Lợi đã tận tình hướngdẫn và động viên tôi trong thời gian thực hiện đề tài tốt nghiệp. Kỹ sư Hồ Viết Thế và các anh chị thuộc Viện nghiên cứu công nghệ sinh họcvà công nghệ môi trường – Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh đã quan tâm giúpđỡ tôi trong suốt thời gian thực hiện đề tài. Toàn thể các bạn lớp CNSH29 thân yêu đã hỗ trợ, giúp đỡ và động viên tôitrong suốt bốn năm qua. Tháng 9 năm 2007 LÊ TRẦN PHÚC KHOA iii TÓM TẮTLÊ TRẦN PHÚC KHOA, Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh. Tháng 9/2007.“Đánh giá đa dạng di truyền của giống lan rừng Dendrobium thu thập tại tỉnh BìnhPhước và thị xã Bảo Lộc (tỉnh Lâm Đồng) bằng kỹ thuật RAPD” Đề tài được tiến hành tại Viện nghiên cứu công nghệ sinh học và công nghệmôi trường – Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh, thời gian từ tháng 3 đến tháng 8năm 2007 nhằm giá đa dạng di truyền của giống lan rừng Dendrobium bằng kỹthuật RAPD, làm tiền đề phục vụ cho công tác chọn, tạo giống lan. Đề tài bao gồmcác nội dung: ly trích DNA tổng số từ lá lan; tối ưu hóa các thành phần phản ứngPCR với marker RAPD; thực hiện phản ứng PCR với các điều kiện đã được tối ưuvà cuối cùng xây dựng cây phân nhóm di truyền bằng các phần mềm NTSYSpc 2.1và Winboot. Kết quả cho thấy, có 6 trên 10 primer RAPD (OPAC10, OPB01,S1384, OPB08, U693, OPAH13) tạo ra sản phẩm khuếch đại với 20 mẫu lan nghiêncứu. Tổng cộng có 57 băng được tạo ra, trong đó có 55 băng đa hình chiếm tỉ lệ96,5% và 2 băng đồng hình chiếm tỉ lệ 3,5%; Trung bình có 9,1 băng đahình/primer. Sản phẩm khuếch đại có kích thước từ 180 – 3000 bp. Phân tích dữliệu RAPD cho thấy nếu xét mức độ tương đồng di truyền của 10 loài lan rừnggiống Dendrobium ở 0,55 thì sẽ chia thành ba nhóm với mức độ tương đồng ditruyền biến thiên trong khoảng từ 0,55 – 0,66. Ba nhóm này bao gồm hai nhómchính (nhóm 1 và 2) và một nhóm phụ (nhóm 3). Ngoài ra, các loài lan Vẩy Rồng(Bảo Lộc), Vẩy Rồng (Bình Phước), Thái Bình (Bình Phước) và Long Nhãn (BìnhPhước) không phân nhóm mà chúng nằm rải rác trên cây phát sinh loài. Điều nàycho thấy các loài lan rừng giống Dendrobium khảo sát có sự đa dạng cao về ditruyền. iv SUMMARYLE TRAN PHUC KHOA, Nong Lam University, Ho Chi Minh City. September,2007. “Revealing genetic diversity of wild Dendrobium orchid at Binh Phuocprovince and Bao Loc town (Lam Dong province) by RAPD technique” Genetic diversity of wild Dendrobium orchid collected from Binh Phuocprovince and Bao Loc town was studied base on RAPD marker to set up thescientific premise for orchid breeding. The phylogenic dendrogram of 20 testedwild Dendrobium was produced base on RAPD polymorphic bands by usingNTSYSpc 2.1 and Winboot solfwares. Cluster analysis based on Dice similaritycoefficient matrix were produced using the unweighted pair – group method witharithmetic average (UPGMA) to group all the studied species. Six from ten RAPDprimer (OPAC10, OPB01, S1384, OPB08, U693, OPAH13) produced a total of 55polymorphic ...