Luận văn Thạc sĩ Sinh học thực nghiệm: Sàng lọc đột biến gen RB1 thể di truyền trên các bệnh nhân ung thư tại Việt Nam

Luận văn “Sàng lọc đột biến gen RB1 thể di truyền trên các bệnh nhân ung thư tại Việt Nam” được tiến hành với muc tiêu: Sàng lọc đột biến gen RB1 thể di truyền gây bệnh ở trẻ em mắc u nguyên bào võng mạc. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn Thạc sĩ Sinh học thực nghiệm: Sàng lọc đột biến gen RB1 thể di truyền trên các bệnh nhân ung thư tại Việt Nam BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ ----------------------------- Họ và tên tác giả luận văn: Nguyễn Thị Thanh Hoa TÊN ĐỀ TÀI LUẬN VĂN:SÀNG LỌC ĐỘT BIẾN GEN RB1 THỂ DI TRUYỀN TRÊN CÁC BỆNH NHÂN UNG THƢ TẠI VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ: SINH HỌC THỰC NGHIỆM Hà Nội- 2019 BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ ----------------------------- Họ và tên tác giả luận văn: Nguyễn Thị Thanh Hoa TÊN ĐỀ TÀI LUẬN VĂNSÀNG LỌC ĐỘT BIẾN GEN RB1 THỂ DI TRUYỀN TRÊN CÁC BỆNH NHÂN UNG THƢ TẠI VIỆT NAM Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 8420114 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC THỰC NGHIỆM NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS.Nguyễn Hải Hà Hà Nội- 2019 Lời cam đoan Tôi xin cam đoan mọi kết quả của đề tài: “Sàng lọc đột biến gen RB1 thểdi truyền trên các bệnh nhân ung thư tại Việt Nam” là công trình nghiên cứu củacá nhân tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa đượccông bố trong các công trình khác. Nếu không đúng như đã nêu trên, tôi xin hoàntoàn chịu trách nhiệm về đề tài của mình. Hà Nội, tháng năm 2019 Học viên Nguyễn Thị Thanh Hoa Lời cảm ơn Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS.Nguyễn Hải Hà – Phó TrưởngPhòng phân tích hệ gen, Viện nghiên cứu hệ gen, người thầy - người chị khôngchỉ hướng dẫn, tạo mọi điều kiện thuận lợi giúp đỡ, chia sẻ những khó khăncùng tôi trong suốt quá trình làm việc và hoàn thành luận văn mà còn trong cuộcsống hàng ngày. Thái độ làm việc chuyên nghiệp của chị đã truyền cảm hứngcho tôi và giúp tôi cải thiện bản thân mình rất nhiều sau thời gian thực tập này. Tôi cũng xin gửi lòng cảm ơn đặc biệt đến TS.Nguyễn Đăng Tôn –TrưởngPhòng phân tích hệ gen, Ths.Nguyễn Phương Nhung, Ths.Ma Thị HuyềnThương và Ths. Trần Thị Bích Ngọc đã luôn theo sát giúp đỡ và chỉ bảo tôitrong suốt quá trình thực hiện luận văn. Qua đây tôi cũng xin cảm ơn tất cả cáccô, các anh, chị trong Viện Nghiên cứu hệ gen đã giúp đỡ tôi rất nhiều trong suốtthời gian tôi thực tập tại đây. Để có được những hiểu biết về kiến thức chuyênngành, tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo ở khoa Công nghệ sinh học -Học viện Khoa học và Công nghệ đã truyền đạt cho tôi những kiến thức bổ íchtrong suốt 2 năm học qua. Cuối cùng, tôi xin gửi lời tri ân tới bố mẹ, những người thân trong gia đìnhvà bạn bè đã luôn ủng hộ, khích lệ và động viên tinh thần tôi trong suốt thời gianthực tập để hoàn thành tốt luận văn thạc sĩ của mình.Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, tháng năm 2019 Học viên Nguyễn Thị Thanh Hoa Danh mục các ký hiệu và chữ viết tắtUNBVM U nguyên bào võng mạcRB1 Retinoblastoma 1DNA Deoxyribonucleic acidRNA Ribonucleic acidcDNA Complement deoxyribonucleic acidmRNA Messenger ribonucleic acid -RNA thông tinbp Base pairdNTPS Deoxyribonucleotide TriphosphatePCR Polymerase chain reactionMLPA Multiplex ligation-dependent probe amplificationUV Ultra violetTAE Tris-axit axetic-EDTAqPCR Quantitative polymerase chain reactionEDTA Ethylene Diamine Tetraacetic AcidDMSO Dimethyl sulfoxide Danh mục các bảng biểu và hình ảnhBẢNG BIỂUBảng 1.1 Hệ thống phân loại Reese Ellsworth cho phân loại u nguyên bào võngmạc ............................................................................................................................. 8Bảng 1.2 Hệ thống phân loại quốc tế cho u nguyên bào võng mạc nội nhãn . …….10Bảng 1.3 Đánh giá nguy cơ mang đột biến RB1 của các thành viên trong gia đìnhcó trẻ bị UNBVM ..................................................................................................... 14Bảng 2.1 Các cặp mồi đặc hiệu cho phản ứng PCR……………………….……26Bảng 3.1 Đặc điểm lâm sàng của các đối tượng nghiên cứu. .................................. 36Bảng 3.2 Nồng độ DNA tổng số của các mẫu bệnh nhi UNBVM. ......................... 40Bảng 3.3 Đột biến RB1 được xác định ở bệnh nhân UNBVM bằng phương phápgiải trình tự Sanger .......……………………………………………………………44Bảng 3.4 Mối liên hệ giữa giá trị DQ và số bản sao. .............................................. .47Bảng 3.5 Các đột biến mất đoạn lớn trên gen RB1 được xác định bằng phươngpháp MLPA…………………………………………………………………......49HÌNH ẢNHHình 1.1 Hình ảnh siêu âm của UNBVM .................................................................. 7Hình 1.2 Hình ảnh cắt lớp vi tính của UNBVM ........................................................ 7Hình 1.3 Soi đáy mắt trước điều trị hóa chất giảm tế bào ....................................... 12Hình 1.4 Soi đáy mắt trước điều trị hóa chất giảm tế bào ....................................... 12Hình 1.5 Giải th ch về mặt di truyền đột biến mất chức năng gen RB1 .................. 16Hình 1.6 Tái tổ hợp trong nguyên phân ................................................................... 17Hình 1.7 Hoạt động bất thường của DNA polymerase trong sao ch p DNA .......... 18Hình 1.8 Sự phân chia bất thường của nhiễm sắc thể trong nguyên phân ........ ...