Nghiên cứu định lượng acyclovir trong huyết tương chó bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

Mục tiêu: Thẩm định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao nhằm định lượng acyclovir trong huyết tương chó. Đối tượng và phương pháp: Loại protein trong huyết tương chó bằng phương pháp tủa protein, sau đó định lượng acyclovir bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu định lượng acyclovir trong huyết tương chó bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao t¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 1-2020 NGHIÊN CỨU ĐỊNH LƯỢNG ACYCLOVIR TRONG HUYẾT TƯƠNG CHÓ BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Lê Văn Thanh1; Vũ Thị Thu Giang2; Trần Cát Đông3 Tạ Mạnh Hùng4; Nguyễn Văn Bạch1 TÓM TẮT Mục tiêu: thẩm định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao nhằm định lượng acyclovir trong huyết tương chó. Đối tượng và phương pháp: loại protein trong huyết tương chó bằng phương pháp tủa protein, sau đó định lượng acyclovir bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao. Khảo sát các điều kiện sắc ký, thẩm định độ đặc hiệu, độ chọn lọc, khoảng tuyến tính, giới hạn định lượng dưới, hiệu suất chiết và độ ổn định của acyclovir theo các tiêu chí của FDA. Kết quả: chiết acyclovir từ huyết tương chó bằng phương pháp tủa protein với dung môi gây tủa là axít percloric 20%; xác định được các điều kiện sắc ký như: cột, pha động, tốc độ dòng, detector. Phương pháp được thẩm định và đạt các tiêu chí theo quy định của FDA. Kết luận: có thể sử dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao để định lượng acyclovir trong huyết tương chó khi đánh giá sinh khả dụng của acyclovir trên chó thực nghiệm. * Từ khóa: Acyclovir; Huyết tương chó; Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao. ĐẶT VẤN ĐỀ thu [1, 2]. Để khắc phục những nhược điểm trên, chúng tôi đã bào chế thành Acyclovir (ACV) là một dẫn chất tổng công viên nén ACV kết dính sinh học, chế hợp của axít nucleosid - guanosin, có tác phẩm đạt tiêu chuẩn cơ sở theo các tiêu dụng mạnh và chọn lọc trên virut gây chí về viên nén của Dược điển Việt Nam bệnh ở người, bao gồm virut Herpes V và dạng thuốc kết dính sinh học giải simplex týp 1 và 2, các virut Varicella- phóng kéo dài. Việc xác định sinh khả Zoster, virut Epstien-barr và cytomegalo. dụng và tương đương sinh học dựa vào Tuy nhiên, ACV có thời gian bán thải các thông số dược động học của viên nén ngắn, hấp thu qua đường tiêu hóa chậm ACV kết dính sinh học là cần thiết [3]. và không hoàn toàn. Với liều hiện nay, Nhằm mục đích đánh giá sinh khả dụng lượng thuốc hấp thu rất thấp (15 - 30%) trên chó thực nghiệm, chúng tôi tiến hành do thời gian lưu trú tại vùng hấp thu ngắn. xây dựng và thẩm định phương pháp sắc Kết quả, hầu hết thuốc được đào thải qua ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) để định phân (50 - 60%) ở dạng không được hấp lượng ACV trong huyết tương chó [4]. 1. Học viện Quân y 2. Trường Đại học Dược Hà Nội 3. Trường Đại học Y Dược TP. Hồ Chí Minh 4. Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung ương Người phản hồi (Corresponding author): Lê Văn Thanh (levanthanh09091963@gmail.com) Ngày nhận bài: 04/09/2019; Ngày phản biện đánh giá bài báo: 03/10/2019 Ngày bài báo được đăng: 02/01/2020 3 T¹P CHÝ Y - d−îc HäC QU¢N Sù Sè 1-2020 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP trong 1.000 ml nước, chỉnh về pH 3,0 bằng NGHIÊN CỨU axít photphoric). 1. Nguyên liệu và thiết bị. + Tốc độ dòng: 1,5 ml/phút. * Nguyên liệu và hóa chất: + Detector: PDA 252 nm. - ACV chuẩn: hàm lượng 99,9% (do Viện + Thể tích tiêm: 100 µl. Kiểm nghiệm Thuốc Trung ương cung cấp). + Nhiệt độ autosampler: 4oC. - Viên nén ACV khả dụng sinh học * Thẩm định phương pháp định lượng đường tiêu hóa (tự bào chế) đạt tiêu chuẩn ACV trong huyết tương chó: cơ sở. - Pha dung dịch ACV chuẩn trong huyết - Huyết tương chó trắng đạt tiêu chuẩn tương trắng: thử thuốc. + Dung dịch chuẩn gốc: nồng độ chính - Các hóa chất khác đạt tiêu chuẩn cho xác 500 µg/ml ACV trong nước cất. HPLC hoặc tinh khiết phân tích. + Pha loãng dung dịch chuẩn gốc với * Thiết bị: huyết tương trắng để thu được mẫu ACV Hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao trong huyết tương có nồng độ 1 và 5 µg/ml. SHIMADZU; máy ly tâm lạnh SARTORIUS + Mẫu chuẩn: pha loãng dãy dung dịch (Đức), máy lắc xoáy VELP (Italia); cân trên với huyết tương trắng để thu được phân tích SARTORIUS (Đức) có độ chính mẫu chuẩn có nồng độ ACV trong từ xác 0,1 mg và các dụng cụ khác đạt tiêu 0,1 - 5 µg/ml. chuẩn phân tích. Quy trình thẩm định phương pháp định 2. Phương pháp nghiên cứu. lượng tiến hành th ...