SẢN XUẤT BỘ KIT TÁCH CHIẾT DNA VÀ BỘ KIT PCR PHÁT HIỆN GEN HALOTHAN TRÊN HEO

Năm 1991, một nhóm các nhà khoa học đứng đầu là MacLennan đã xác định được trình tự gen halothan (Fujii và ctv, 1991). Ở heo, gen halothan nằm trên nhiễm sắc thể số 6, gồm 2 alen: N và n, tạo nên 3 kiểu gen NN, Nn và nn. Theo MacLennan và cộng sự, gen đột biến lặn n là kết quả của sự đột biến C-cytosin thành T-thymin ở vị trí base 1843 của gen mã hóa thụ thể ryanodin (ryr-1), thụ thể này nằm trong kênh phóng thích canxi của lưới nội bào ở tế bào cơ...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
SẢN XUẤT BỘ KIT TÁCH CHIẾT DNA VÀ BỘ KIT PCR PHÁT HIỆN GEN HALOTHAN TRÊN HEO 1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***000*** LƢƠNG QUÝ PHƢƠNGSẢN XUẤT BỘ KIT TÁCH CHIẾT DNA VÀ BỘ KIT PCR PHÁT HIỆN GEN HALOTHAN TRÊN HEO Luận văn kỹ sư Chuyên ngành: công nghệ sinh học Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8/2006 2 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***000*** SẢN XUẤT BỘ KIT TÁCH CHIẾT DNA VÀ BỘ KIT PCR PHÁT HIỆN GEN HALOTHAN TRÊN HEO Luận văn kỹ sư Chuyên ngành: công nghệ sinh họcGiáo viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện:PGS.TS. NGUYỄN NGỌC TUÂN Lương Quý PhươngPGS.TS. TRẦN THỊ DÂN Khóa: 2002-2006 Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8/2006 3 MINISTRY OF TRAINING AND EDUCATION HCMC NONG LAM UNIVERSITY DEPARTMENT OF BIOTECHNOLOGY ***000*** PRODUCTION DNA EXTRACTION KIT AND PCR KIT TO DETECT HALOTHAN GENE IN THE PIG Engineer essay Speciality: BiotechnologyAdvisor: Student:Assoc.Prof.Dr NGUYEN NGOC TUAN Luong Quy PhuongAssoc.Prof.Dr TRAN THI DAN Course: 2002-2006 Ho Chi Minh city August-2006 1 LỜI CẢM TẠ Đầu tiên, con xin gửi đến ba má lòng thành kính ghi ơn. Con kính chúc ba másức khỏe dồi dào, con sẽ luôn phấn đấu để trở thành người có ích cho xã hội để khôngphụ công dưỡng dục của ba má. Chân thành gửi lời cảm ơn đến:  Ban giám hiệu trường Đại Học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh, ban chủ nhiệm Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học cùng tất cả các quý thầy cô đã tận tụy truyền đạt những kiến thức quý báu cho tôi trong suốt quãng thời gian học tập tại trường.  Ban giám đốc cùng tập thể cán bộ nhân viên Trung Tâm Phân Tích Thí Nghiệm trường Đại Học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh đã tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong quá trình thực tập tốt nghiệp.  Tập thể cán bộ thú y và các cô chú tại lò mổ tập trung huyện Dĩ An, tỉnh Bình Dương đã nhiệt tình giúp đỡ tôi trong suốt quá trình lấy mẫu. Em trân trọng biết ơn thầy Nguyễn Ngọc Tuân và cô Trần Thị Dân đã tận tìnhhướng dẫn, truyền đạt những kinh nghiệm quý báu và tạo điền kiện thuận lợi cho emtrong thời gian thực tập tốt nghiệp. Em gửi lời cảm ơn chân thành đến anh Nguyễn Văn Út và chị Bùi Thị ThuTrang đã giúp đỡ, động viên, chỉ dẫn tận tình trong lúc em tiến hành đề tài tốt nghiệp. Cảm ơn tất cả bạn bè đã chia sẻ cùng tôi những khó khăn vất vả, vui buồn trongquá trình học tập tại trường và trong thời gian thực tập tốt nghiệp. 2 TÓM TẮT KHÓA LUẬN Lương Quý Phương, Đại Học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh, tháng 8/2006,“SẢN XUẤT BỘ KIT TÁCH CHIẾT DNA VÀ BỘ KIT PCR PHÁT HIỆN GENHALOTHAN TRÊN HEO” Hướng dẫn khoa học: 1. PGS. TS. Nguyễn Ngọc Tuân 2. PGS. TS. Trần Thị Dân Đề tài được thực hiện từ ngày 28-02-2006 đến ngày 28-07-2006 tại Trung TâmPhân Tích Thí Nghiệm Trường Đại Học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh. Gen halothan là gen có những tác động quan trọng đến phẩm chất thịt, sự sinhtrưởng và sinh sản của heo. Do đó, sản xuất bộ kit tách chiết DNA và bộ kit PCR đểphát hiện gen halothan trong đàn heo giống một cách nhanh chóng, tiện lợi, hiệu quả. Quá trình thực hiện đề tài đạt được những kết quả sau:1. Rút ngắn thời gian tách chiết DNA: Giảm thời gian ủ mẫu trong dung dịch phângiải tế bào từ 1 giờ còn 30 phút, giảm thời gian tủa DNA lần 1 từ 2 giờ còn 1 giờ,không thực hiện giai đoạn tủa DNA lần 2, thực hiện việc hòa tan DNA trong TE trong2 giờ thay vì để qua đêm. Độ tinh sạch và hàm lượng DNA ở các thí nghiệm khác biệtkhông có ý nghĩa so với độ tinh sạch và hàm lượng DNA tách chiết theo qui trình củaLê Thị Thu Phương (2004).2. Thiết ...