Tạo dòng kháng nguyên fliC của Edwardsiella ictaluri khảm trong tiêm mao của Bacillus subtilis

Tạo dòng B. subtilis mang protein fliC của E. ictaluri khảm trong tiêm mao hướng đến ứng dụng làm vaccin phòng bệnh gan thận mủ ở cá tra
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tạo dòng kháng nguyên fliC của Edwardsiella ictaluri khảm trong tiêm mao của Bacillus subtilisNghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 2 * 2019 TẠO DÒNG KHÁNG NGUYÊN FLIC CỦA EDWARDSIELLA ICTALURI KHẢM TRONG TIÊM MAO CỦA BACILLUS SUBTILIS Huỳnh Xuân Yến*, Nguyễn Anh Minh*, Trần Cát Đông*, Vũ Thanh Thảo*TÓM TẮT Mở đầu: Những năm gần đây, bệnh gan thận mủ gây ra bởi vi khuẩn Edwardsiella ictaluri đã gâynhiều tổn thất nghiêm trọng về kinh tế cho các hộ nuôi cá tra ở vùng Đồng bằng sông Cửu Long. Phòngngừa bệnh bằng vaccin là một lựa chọn tốt hơn so với điều trị bằng kháng sinh. Protein fliC của E. ictaluriđược quan tâm như một kháng nguyên tiềm năng. Đồng thời, Bacillus subtilis là một ứng viên trong việclàm giá mang kháng nguyên thế hệ mới. Mục tiêu: Tạo dòng B. subtilis mang protein fliC của E. ictaluri khảm trong tiêm mao hướng đến ứngdụng làm vaccin phòng bệnh gan thận mủ ở cá tra. Phương pháp: Trình tự mang tính kháng nguyên fliC được biểu hiện bởi chủng Escherichia coliBL21(DE3) để làm vaccin subunit đối chứng. Đồng thời, trình tự này cũng được sử dụng để tạo dòng B.subtilis mang protein kháng nguyên fliC khảm trong tiêm mao. Các chủng B. subtilis tái tổ hợp được kiểmtra về khả năng di động và biểu hiện tiêm mao. Kết quả: Protein kháng nguyên fliC với kích thước khoảng 11 kDa được biểu hiện thành công nhờchủng E. coli BL21(DE3). Nghiên cứu cũng tạo dòng thành công chủng B. subtilis mang kháng nguyênfliC khảm trong tiêm mao. Chủng B. subtilis này có khả năng di động và biểu hiện tiêm mao. Kết luận: Chủng B. subtilis tái tổ hợp thu được thể hiện nhiều tiềm năng để phát triển thành mộtvaccin đường uống có khả năng sử dụng như một chế phẩm probiotic. Từ khóa: Edwardsiella ictaluri, vaccin đường uống, protein fliC, protein hag.ABSTRACT CLONING OF MOSAIC FLIC ANTIGEN OF EDWARDSIELLA ICTALURI IN BACILLUS SUBTILIS FLAGELLA Huynh Xuan Yen, Nguyen Anh Minh, Tran Cat Dong, Vu Thanh Thao * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol. 23 - No 2- 2019: 24 – 31 Background : Recently, catfish farming in the Mekong Delta of Vietnam has been challenging with adisease named “Enteric septicemia of catfish” (ESC). ESC is a highly fatal systemic infection caused by thebaterium Edwardsiella ictaluri. Vaccination is a better option than treatment. Protein fliC of E. ictaluri hasbeen considered as a potential antigen. Moreover, Bacillus subtilis presents to be a new generationrecombinant protein carrier. Method: The predicted antigenic region of fliC is expressed by Escherichia coli BL21(DE3) to serve ascontrol subunit vaccine. Moreover, this antigenic region is also used to clone B. subtilis with mosaic fliCantigen in its flagella. The recombinant strain is tested for its motility and capability to express its flagella. Result: The antigenic region of fliC is successfully expressed by E. coli BL21(DE3) and is detected at the11 kDa band on SDS-PAGE 18%. The research also succeeds in cloning a B. subtilis strain with mosaic fliCantigen in its flagella. The results show that this B. subtilis strain is motile and able to express its flagella. * Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: TS. Vũ Thanh Thảo ĐT: 02838295641 – 127 Email: vuthanhthao@ump.edu.vn24 Chuyên Đề DượcY Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 2 * 2019 Nghiên cứu Y học Conclusion: The recombinant B. subtilis strain is expected to use as an oral vaccine which can be easilyused as a daily probiotics product. Key words: Edwardsiella ictaluri, oral vaccine, protein fliC, protein hagMỞĐẦU tốn kém về nhân lực còn phương pháp ngâm trong huyền phù chỉ ứng dụng được trên một Bệnh gan thận mủ do vi khuẩn số chủng vi sinh vật gây bệnh đơn giản(11).Edwardsiella ictaluri gây ra trên cá da trơn, Chủng ngừa bằng đường uống trước đây ítđặc biệt là cá tra thường xảy ra vào cuối được quan tâm vì các nhược điểm như: khángxuân, đầu hạ, phát triển nhanh chóng, lây nguyên hòa tan tạo ra phản ứng miễn dịchlan mạnh và có tỷ lệ chết cao gây thiệt hại kém, có thể bị phân hủy trong dạ dày, hấp thunghiêm trọng cho các hộ nuôi cá tra ở Đồng và dung nạp hạn chế. Để khắc phục các nhượcbằng sông Cửu Long(2). Cơ chế lây lan của điểm này, vaccin uống được gắn lên các giábệnh là thông qua đường miệng, cá bệnh sẽ mang như Bacillus subtilis - ...