Thức ăn chăn nuôi - Xác định hàm lượng monensin bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

Tham khảo tài liệu thức ăn chăn nuôi - xác định hàm lượng monensin bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao, nông - lâm - ngư, nông nghiệp phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Thức ăn chăn nuôi - Xác định hàm lượng monensin bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN10TCN TIÊU CHUẨN NGÀNH 10TCN 835:2006THỨC ĂN CHĂN NUÔI - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNGMONENSIN BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Animal feeding stuffs - Determination of monensin content by high - performance liquid chromatographic method HÀ NỘI - 2006TIÊU CHUẨN NGÀNH 10 TCN 835 : 2006 THỨC ĂN CHĂN NUÔI - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG MONENSIN BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Animal feeding stuffs - Determination of monensin content by high - performance liquid chromatographic method (Ban hành kèm theo Quyết định số QĐ/BNN-KHCNngày tháng 12 năm 2006 của Bộ trưởng Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn)1.Ph¹mvi¸pdôngTiªu chuÈn nµy ¸p dông ®Ó ph©n tÝch hµm lîng kh¸ngsinhmonensintrongthøc¨nch¨nnu«ib»ngph¬ngph¸ps¾ckýlánghiÖun¨ngcao(HPLC).Giíih¹nph¸thiÖncñaph¬ngph¸plµ40mg/kg.2.TµiliÖuviÖndÉnC¸ctµiliÖuviÖndÉnsau®©yrÊtcÇnthiÕtchoviÖc¸pdôngtiªuchuÈn.§èivíic¸ctµiliÖuviÖndÉnghin¨mbanhµnhth׸pdôngphiªnb¶n®îcnªu.§èivíic¸ctµiliÖuviÖndÉnkh«ngghin¨mbanhµnhth׸pdôngphiªnb¶nmíinhÊt,baogåmc¶c¸csöa®æi:TCVN 4851 (ISO 3696). Níc dïng ®Ó ph©n tÝch trongphßngthÝnghiÖm.YªucÇuküthuËtvµph¬ngph¸pthö.ISO6497:2002(E).AnimalfeedingstuffsSampling.3.Nguyªnt¾cMonensin trongmÉuthøc¨nch¨nnu«i®îct¸chchiÕtb»ng metanol, sau ®ã t¹o dÉn xuÊt b»ng 2,4dinitrophenylhydrazine (DNP) trong m«i trêng axit ë55oC,t¸chvµ®ÞnhlîngtrªnhÖthèngs¾ckýlánghiÖun¨ngcaovíidetectorUVëbícsãng392nm.4.ThiÕtbÞ,dôngcô4.1.M¸ynghiÒnmÉuphßngthÝnghiÖm.4.2.SµngphßngthÝnghiÖm,cãkÝchthíclçsµng1,00mmvµ3,00mm.4.3.C©nph©ntÝchcã®échÝnhx¸c0,0001g.4.4.C©nküthuËtcã®échÝnhx¸c0,01g. 24.5. M¸y ly t©m l¹nh cã tèc ®é 3000 vßng/phót, södôngènglyt©mdungtÝch30ml.4.6. èng ly t©m, dung tÝch 30 ml b»ng polypropylenhoÆcb»ngthuûtinh,cãn¾p®Ëy.4.7.TñÊm,cãkh¶n¨ngduytr×nhiÖt®éæn®Þnhë55oC±1oC.4.8.M¸yl¾ctrßnhoÆcm¸yl¾cngangcãthÓ®¹ttèc®é250vßng/phót.4.9.èngnghiÖmdungtÝch10mlcãnótxo¸y.4.10.B×nh®ÞnhmøcdungtÝch10,100,1000ml.4.11.Pipettù®éng®iÒuchØnh®îctõ1ml®Õn30ml.4.12.MicropipetdungtÝchtõ10µl®Õn100 µlvµtõ200µl®Õn1000µl.4.13.Hótdungm«itù®éng2ml,10ml,20ml.4.14.M¸yl¾cèngnghiÖm(Vortexmixer).4.15.èng®ong1000ml.4.16.BÓsiªu©m.4.17.B¬mhótch©nkh«ng.4.18.MµngläcsyranhcãkÝchthíc0,45µm.4.19.B×nhnãndungtÝch125ml.4.20.Länhá®ùngdÞchmÉuchuyªndôngchoHPLC,cãn¾pvÆnPTFE.4.21.ThiÕtbÞtrénmÉuphßngthÝnghiÖmlo¹iHobartModelC100ThoÆct¬ng®¬ng.4.22.ThiÕtbÞchiamÉu:ThiÕtbÞchia®«ihoÆcchiatmÉu:vÝdônhthiÕtbÞchiath×nhnãn,thiÕtbÞchianhiÒung¨ncãhÖthèngph©n h¹t hoÆc c¸c thiÕt bÞ chia kh¸c ®¶m b¶o ph©nchiamÉuthÝnghiÖmthµnhmÉuthö®ångnhÊt.4.23.Hép®ùngmÉucãn¾pkÝn.4.24.HÖthèngHPLCgåmcã:4.24.1.M¸ys¾ckÝlánghiÖun¨ngcao,b×nhchøadungm«i,hÖthèngb¬mmÉu,detectorUV®Æt®îcëbícsãng392nm,m¸yghihoÆcbétÝchph©n. 34.24.2.Cétph©ntÝchHPLCpha®¶ocãkÌmcétb¶ovÖ ChiÒudµi150mm §êngkÝnhtrong4,6mm H¹tnhåiC18;5 µmhoÆct¬ng®¬ng5.HãachÊtvµthuècthö5.1.Ho¸chÊtChØsödôngho¸chÊt®îcc«ngnhËn®¹tchÊtlîngtinhkhiÕtph©ntÝchvµníccÊtcÊph¹ng1theoTCVN4851(ISO3696).C¸cdungm«iph¶i®¹tchÊtlîng®Ódïngchoph©ntÝchHPLC.5.1.1.Metanol.5.1.2.Axitacetic(100%).5.1.3.Acetonitrile5.1.4.ChÊtchuÈnmonensin,d¹ngmuèinatrimonensin,lo¹itinhkhiÕt,cãkÌmtheogiÊychøngnhËnhµm lîng.5.2.Thuècthö5.2.1.Tricloaceticaxit(TCA),dungdÞch500mg/ml.C©n50gTCAchÝnhx¸c®Õn0,01gchovµob×nh®Þnhmøc100ml,hßatanvµ®Þnhmøcb»ngníccÊt.L¾cküdungdÞch.5.2.2.ThuècthöDNP,dungdÞch1mg/mltrongmetanol.C©n 100mg DNP chÝnh x¸c ®Õn 1mg vµo b×nh ®Þnh møc100ml,hßatanvµ®Þnhmøc®Õnv¹chb»ngmetanol.L¾cküdungdÞch.5.2.3.Pha®éngchoHPLC.Hçn hîp metanol: dung dÞch axit acetic 1,5% tØ lÖ90:10theothÓtÝch(v/v).5.2.3.1. Dung dÞch axit acetic 1,5% trong níc, theotØlÖthÓtÝch(v/v).Cho 15ml axit acetic (5.1.2) vµo b×nh ®Þnh møc1000ml.ThªmníccÊt®Õnv¹ch®Þnhmøc.L¾c®ÒudungdÞch.5.2.3.2.Hçnhîppha®éng. 4Cho900mlmetanolvµoèng®ongdungtÝch1000ml.ThªmtiÕp100ml dungdÞchaxit acetic 1,5% (5.2.3.1). Sau®ã läc hçn hîp dung m«i thu ®îc qua phÔu hót ch©nkh«ngvíimµngläccãkÝchthíclç0,45 µm,siªu©m®uæikhÝënhiÖt®éthêngtrong30phót.5.2.4.DungdÞchchuÈn5.2.4.1.DungdÞchchuÈngèc1000µg/mlTïytheohµmlîngmonensinghitronggiÊychøngnhËn(5.1.4), c©n mét lîng nhÊt ®Þnh chÊt chuÈn natrimonensin chÝnh x¸c ®Õn 0,1mg cho vµo b×nh ®Þnh møcdungtÝch100ml, phalo∙ngvµ®Þnhmøcb»ngmetanol®Ó sao cho thu ®îc dung dÞch gèc cã nång ®é1000µg/ml.DungdÞchchuÈngèc®îcb¶oqu¶ntronglän©uë40C,cãthÓsödông®îctrongvßng2tuÇn.5.2.4.2.DungdÞchchuÈnlµmviÖc100µg/ml.Hót chÝnh x¸c 10ml dun ...