Nhận xét bước đầu về nuôi cấy tế bào gốc trung mô từ mô mỡ người tại Bệnh viện Trung Ương Huế

Mục tiêu: Đánh giá số lượng tế bào gốc trung mô từ mô mỡ người ở hai môi trường nuôi cấy khác nhau. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Mẫu mô mỡ người.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nhận xét bước đầu về nuôi cấy tế bào gốc trung mô từ mô mỡ người tại Bệnh viện Trung Ương HuếBệnh viện Trung ương HuếNHẬN XÉT BƯỚC ĐẦU VỀ NUÔI CẤY TẾ BÀO GỐC TRUNG MÔ TỪ MÔ MỠ NGƯỜI TẠI BỆNH VIỆN TRUNG ƯƠNG HUẾ Nguyễn Duy Thăng1, Phan Thị Thùy Hoa1, Chế Thị Cẩm Hà2, Đồng Sĩ Sằng1, Trần Ngọc Vũ1, Tôn Nữ Trà Mai1, Huỳnh Phước Hạnh1 TÓM TẮT Mục tiêu: Đánh giá số lượng tế bào gốc trung mô từ mô mỡ người ở hai môi trường nuôi cấy khác nhau. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Mẫu mô mỡ người. Kết quả: Sau 20 ngày nuôi cấy tế bào, số lượng tế bào thu được 4,5 x 105 tế bào/ml ở môi trường 1 vàhiệu quả phát triển tế bào đạt 85,5%. Ở môi trường 2, số lượng tế bào thu được là 2,2 x 105 tế bào/ml vàhiệu quả phát triển tế bào đạt 70,7%. Kết luận: Tế bào được nuôi cấy trên môi trường DMEM/F12, 10% FBS, 1% antibiotic/antimycotic thu đượcsố lượng tế bào đơn nhân cao nhất (4,5 ± 0,4) x 105 tế bào/ml và hiệu quả phát triển tế bào đạt trên 85,5%. Từ khoá: Tế bào gốc trung mô từ mỡ, enzyme collagenase, glucose, nuôi cấy, biệt hoá. ABSTRACT STUDY ON CULTURE OF MESENCHYMAL STEM CELLS FROM HUMAN ADIPOSE TISSUE AT HUE CENTRAL HOPITAL Nguyen Duy Thang1, Phan Thi Thuy Hoa1, Che Thi Cam Ha2, Dong Si Sang1, Tran Ngoc Vu1, Ton Nu Tra Mai1, Huynh Phuoc Hanh1 Objective: Determinating the MSC counts after culturing cells from two different culture environments. Research methods: A sample from human adipose tissue. Results: After 20 days of culturing cells, MSC counts are 4.5x105 cells/ml on the environment 1 and 5 cells/ml and 70,7% cell growth Conclusion: The cells cultured on the enviroment DMEM/F12, 10% FBS, 1% antibiotic/antimycotichave the highest mononuclear cell count: (4.5 ± 0.4) x 105 Key words: Adipose-derived mesenchymal stem cells, enzyme collagenase, glucose, in vitro,differentiate. “Đây là kết quả của đề tài KHCN cấp Tỉnh được Ngân sách nhà nước tỉnh Thừa Thiên Huế đầutư”. Chúng tôi xin trân trọng cảm ơn sự hỗ trợ này! I. ĐẶT VẤN ĐỀ nguồn kh c nhau, trong đó c c nguồn thu nhận ph Tế bào gốc trung mô (MSC) là quần thể tế bào có biến là ở tủy xương, dây rốn. Mô mỡ là nguồn MSCđặc t nh tự làm mới và biệt ho đa dạng trong môi có mặt ở kh p mọi nơi và có một số lợi thế so vớitrường th ch hợp, MSC có thể thu nhận từ rất nhiều c c nguồn tế bào gốc kh c, có thể thu nhận với số 1. Bệnh viện TW Huế - Ngày nhận bài (Received): 25/11/2018; Ngày phản biện (Revised): 3/12/2018; 2. Trường Đại học Khoa học Huế - Ngày đăng bài (Accepted): 25/12/2018 - Người phản hồi (Corresponding author): Phan Thị Thùy Hoa - Email: drhoavn@gmail.com; ĐT: 0905 997 687Tạp Chí Y Học Lâm Sàng - Số 52/2018 3 Nhận xét bước đầu Bệnh về nuôi viện cấy Trung tế ương bào gốc... Huếlượng lớn, ít xâm hại cơ thể, có tính mềm dẻo cao 2.2.3. Quy trình nghiên cứuvà khả năng biệt hoá thành tế bào mỡ, tế bào xương, - Hút 5 ml dịch mỡ bụng, quy trình được thựctế bào cơ, tế bào gan, tế bào thần kinh và các tế bào hiện tại khoa Gây mê Hồi sức.nội mô và biểu mô . - Thủy phân mô mỡ bằng enzyme collagenase Hiệu quả của MSC từ mô mỡ đã được chứng và phân lập tế bào đơn nhân: Tiến hành ủ 5ml mỡminh trong liệu pháp tế bào và y học tái tạo như tái hút đã xử lý với 5mg collagenase/5ml PBS trongtạo cơ tim, da, gan, tụy, xương, sụn, … Nhiều công vòng 30 phút trong tủ ấm ở nhiệt độ 37°C, khuấytrình nghiên cứu về nuôi cấy tăng sinh tế bào gốc nhẹ liên tục sau 10 phút. Lọc bằng màng lọc 70µm.trung mô in vitro cho thấy số lượng MSC trong mỗi Dịch được lọc cho vào ống falcon 15ml, ly tâm 800liệu trình ghép tế bào gốc là 109 tế bào/kg thể trọng. vòng/phút trong 10 phút ở nh ...