Xây dựng phương pháp định lượng leuprolid tronghuyết thanh chó bằng Phương pháp LC-MS/MS

Nghiên cứu dược động học của leuprolid sử dụng kỹ thuật LC-MS/MS để định lượng dược chất trong huyết thanh nhằm tăng độ chọn lọc, đặc hiệu của phương pháp. Mục đích của nghiên cứu là xây dựng và thẩm định một phương pháp định lượng bằng LC-MS/MS để xác định nồng độ leuprolid trong huyết thanh chó.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xây dựng phương pháp định lượng leuprolid tronghuyết thanh chó bằng Phương pháp LC-MS/MSNghiên cứu Dược & Thông tin thuốc 2023, Tập 14, Số 3, trang 27-34 BÀI NGHIÊN CỨUDetermination of leuprolide in dog serumusing LC-MS/MS Phan Thi Nghia2*, Hoang Van Duc2, Nguyen Thanh Lam1, Tran Thi Hai Yen1 1 Hanoi University of Pharmacy, 13-15 Le Thanh Tong, Hoan Kiem, Hanoi 2 National Institute of Drug Quality Control, 48 Hai Ba Trung, Hoan Kiem, Hanoi *Corresponding author: Tran Thi Hai Yen, email: yentth@hupedu.vn ABSTRACT Studying leuprolide pharmacokinetics using the LC-MS/MS technique to overcome selectiveand sensitive detection. This study aimed to develop and validate a high throughput andspeci c method using liquid chromatography-tandem mass spectrometry to determineleuprolide in dog serum. Leuprolide and internal standard (paracetamol) were prepared fromdog serum using protein precipitation followed by liquid-liquid extraction. The preparedsamples were chromatographed on a C18 column (50 x 2.1mm, i.d., 1.7 µm) with isocraticelution at a ow rate of 0.2 ml/min using acetonitrile - a solution containing 10mM ammoniumbicarbonate at suitable ratio. The ion transitions at m/z 605.4→ 249.1 (leuprolide) and m/z 152→ 110 (paracetamol) were monitored under the positive ion mode of electrospray ionizationwith multiple reaction monitoring. The standard curves were linear in the range of 0.05 to 50ng/ml for Leuprolide with a mean correlation coe cient greater than 0.99. The intra-day andinter-day precision and accuracy were within 93.9% - 119.1% with CV≤ 10%. The assay wasapplied to determine concentrations of leuprolide in dog serum in pharmacokinetic andbioavailability studies. Keywords: dog serum, mass spectrometry, leuprolide, LC-MS/MS, protein precipitation. 27Nghiên cứu Dược & Thông tin thuốc 2023, Tập 14, Số 3, trang 27-34Xây dựng phương pháp định lượng leuprolid tronghuyết thanh chó bằng Phương pháp LC-MS/MS Phan Thị Nghĩa2*, Hoàng Văn Đức2, Nguyễn Thành Lâm1, Trần Thị Hải Yến1 1 Trường Đại học Dược Hà Nội, 13-15 Lê thánh Tông, Hoàn Kiếm, Hà Nội 2 Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương, 48 Hai Bà Trưng, Hoàn Kiếm, Hà Nội * Tác giả liên hệ: Trần Thị Hải Yến, email: yentth@hupedu.vn (Ngày gửi đăng: 07/05/2023 – Ngày duyệt đăng: 30/07/2023) TÓM TẮT Nghiên cứu dược động học của leuprolid sử dụng kỹ thuật LC-MS/MS để định lượngdược chất trong huyết thanh nhằm tăng độ chọn lọc, đặc hiệu của phương pháp. Mục đíchcủa nghiên cứu là xây dựng và thẩm định một phương pháp định lượng bằng LC-MS/MSđể xác định nồng độ leuprolid trong huyết thanh chó. Leuprolid và chuẩn nội(paracetamol) được chiết tách từ huyết thanh chó bằng phương pháp tủa protein, sau đóchiết lỏng-lỏng. Sử dụng cột C18 (50 x 2,1mm, 1,7 µm), tốc độ dòng 0,2 ml/phút, pha độngacetonitril - dung dịch amoni bicarbonat 10 mM. Giá trị m/z của ion 605,4 → 249,1(leuprolid) and 152 → 110 (paracetamol) với nguồn ESI và kiểu MRM. Khoảng tuyến tínhcủa đường chuẩn 0,05 to 50 ng/ml với hệ số tương quan lớn hơn 0,99. Kết quả độ đúngtrong ngày, khác ngày trong khoảng 93,9% - 119,1% với CV≤ 10%. Phương pháp có thể ápdụng để định lượng nồng độ leuprolid trong huyết thanh chó trong nghiên cứu dược độnghọc và sinh khả dụng. Từ khóa: dog serum, mass spectrometry, leuprolide, LC-MS/MS, protein precipitation. 1. Giới thiệu độ rất thấp (2). Như vậy việc xác định nồng độ Leuprolid là một thuốc tương tự hormon leuprolid trong huyết thanh đòi hỏi phươnggiải phóng gonadotropin. Thuốc được chỉ pháp phân tích phải có độ nhạy, độ đặc hiệuđịnh để điều trị ung thư tuyến tiền liệt giai cao, khoảng tuyến tính rộng. Dựa trên nguyênđoạn muộn, lạc nội mạc tử cung, dậy thì sớm lý hoạt động của phương pháp sắc ký lỏng -ở trẻ em (1). Sau khi tiêm bắp trên chó với khối phổ, các phương pháp chiết tách vàmức liều 3,75 mg leuprolid acetat, nồng độ tham khảo tài liệu (3), (4), chúng tôi đã tiếnleuprolid trong huyết thanh chó tăng nhanh hành nghiên cứu xây dựng phương pháp sắcvà đạt đỉnh (Cmax) khoảng 25 ng/ml sau ký lỏng hiệu năng cao ghép nối với detectorkhoảng 2 giờ, sau đó giảm và duy trì ở nồng ...