Xây dựng quy trình định lượng đồng thời hesperidin và diosmin trong viên nén bao phim diosflon

Mục tiêu: Nghiên cứu phương pháp định lượng chế phẩm DIOSFLON có chứa diosmin 450 mg và hesperidin 50 mg. Nghiên cứu tiến hành dùng dimethyl sulfosid (DMSO) chiết diosmin và hesperidin ra khỏi chế phẩm và dùng phương pháp HPLC để định lượng hai hoạt chất này.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xây dựng quy trình định lượng đồng thời hesperidin và diosmin trong viên nén bao phim diosflonNghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 1 * 2011XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜIHESPERIDIN VÀ DIOSMIN TRONG VIÊN NÉN BAO PHIM DIOSFLONNguyễn Hà Mỹ Thùy*, Nguyễn Minh Đức*TÓM TẮTMục tiêu: Nghiên cứu phương pháp định lượng chế phẩm DIOSFLON có chứa diosmin 450 mg vàhesperidin 50 mg.Phương pháp: Dùng dimethyl sulfosid (DMSO) chiết diosmin và hesperidin ra khỏi chế phẩm và dùngphương pháp HPLC để định lượng hai họat chất này.Kết quả: Quy trình định lượng HPLC đã xây dựng và thẩm định cho phép định lượng đồng thời hesperidinvà diosmin với hệ số R2hesperidin= 0,9998, R2diosmin =0,9999, độ chính xác với RSD hesperidin=0,54%; RSDdiosmin=0,08%; độ đúng với tỷ lệ phục hồi 99,02 % với diosmin và 102,21 % với hesperidin.Kết luận: Quy trình định lượng đồng thời diosmin và hesperidin bằng phương pháp HPLC đáng tin cậy vàkhả thi, có thể ứng dụng vào kiểm nghiệm.Từ khóa: diosmin, hesperidin, HPLC, DIOSFLON.ABSTRACTSIMULTANEOUS QUANTITATIVE DETERMINATION OF DISOMINE AND HESPERIDINEIN DIOSFLON FILM-COATED TABLETSNguyen Ha My Thuy, Nguyen Minh Duc* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 15 - Supplement of No 1 - 2011: 570 - 573Objectives: Study of a simultaneous quantititative method for DIOSFLON film-coated tablets containingdiosmine 450 mg and hesperidine 50 mg.Method: Extraction of disomine and hesperidine by using dimethyl sulfoxyd (DMSO) prior to applicationto HPLC.Results: The validated HPLC procedure allowed to analyze quantitatively hesperidine và diosmine in theproduct.Conclusions: The established HPLC method is reliable and applicable for simultaneous quantitativedetermination of disomine and hesperidine in ratio 9:1.Key words: Diosmine, hesperidine, HPLC, DIOSFLON.mạch mạn tính. Hiện nay nhu cầu việc điều trịĐẶT VẤN ĐỀbệnh này ngày càng tăng, trong khi đó thuốcBệnh suy tĩnh mạch là một bệnh khá phổngọai nhập giá rất đắt. Vì vậy việc nghiên cứubiến hiện nay, thể hiện qua các chứng vỡ maocác chế phẩm có chứa hai họat chất này càngmạch, trĩ và số triệu chứng tim mạch khác(3).được nhiều công ty dược Việt Nam quan tâm.DAFLON® một sản phẩm khá phổ biếncủaTuy nhiên, việc kiểm nghiệm đồng thời hai họathãng dược phẩm Servier chứa hai họat chất làchất này vẫn gặp nhiều khó khăn.diosmin 450 mg và hesperidin 50 mg với tỷ lệ làĐề tài này nhằm mục đích xây dựng 1 quy9: 1 có tác dụng chính trong diều trị suy tĩnh*Khoa Dược – Đại Học Y Dược TP.HCMTác giả liên lạc: GS. TS. Nguyễn Minh Đức570ĐT: 0908989865Email: ducng@hcm.vnn.vnChuyên Đề Dược KhoaY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 1 * 2011trình kiểm nghiệm đồng thời diosmin vàhesperidin trong viên DIOSFLON chứa 2flanonoid nói trên với tỷ lệ 9:1.ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUĐối tượng nghiên cứuViên nén bao phim DIOSFLON 500, là sảnphẩm nghiên cứu của Ban NCKH-TV, được sảnxuất tại Cty dược Roussel Việt Nam.Chất đối chiếu, hóa chất, dung môiChất đối chiếu: diosmin hàm lượng tính theokhan 95%, độ ẩm 6,41 % (Mekophar), hesperidinhàm lượng nguyên trạng 80% (Merck).Dung môi, hóa chất: methanol HPLC(Merck), acid acetic, DMSO PA, nước cất.Thiết bịMáy HPLC Shimadzu 20-AD,Eurosphere LC 18 (150 x 4,6 mm, 5μm)cộtNghiên cứu Y họcPhương pháp nghiên cứuQua nhiều khảo sát trên các tỷ lệ dung môikhác nhau chúng tôi chọn được pha động với tỷlệ như sau acicid acetic: methanol:nước(30:32:65), Detector-UV 275 nm, thể tích bơm 20μl, nhiệt độ cột 25 0C, tốc độ dòng 1,2 ml. Vớiđiều kiện trên, 2 píc hesperidin và diosmin táchrõ đẹp trên sắc đồ HPLC.Chiết hai họat chất ra khỏi chế phẩm bằngDMSO, tiến hành pha loãng sao cho hàm lượngmẫu chế phẩm và mẫu đối chiếu có hàm lượnglà diosmin chuẩn 450 μg/ml, hesperidin chuẩn50 μg/ml. Tiến hành xác định đường hồi quytuyến tính, độ đúng và độ chính xác(1).KẾT QUẢSắc ký đồ HPLC thể hiện phân lập đồng thờihesperidin và diosminHình 1. Sắc ký đồ HPLC mẫu chế phẩm(trên) và mẫu đối chiếu (dưới).Chuyên Đề Dược Khoa571Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 1 * 2011Nghiên cứu Y họcTính tương thích hệ thống3000000Tiến hành tiêm lần lượt mẫu dung dịch thử6 lần, chúng tôi thu được kết quả tính như sau.2500000Bảng 1. Kết quả khảo sát tính tương thích hệ thốnghỗn hợp diosmin-hesperidin 9:1TêntRNồngđộ/ ly = 19396x - 26707R2 = 0.9998200000015000001000000SNAFhesperidin 7,94088360589440,802500000hesperidin 7,89188824490520,7990hesperidin 7,86288374590900,790hesperidin 7,83988590891340,812hesperidin 7,84588087291280,821hesperidin 7,82288407790750,806Trung bình 7,86688440890700,812050100150Diện tích đỉnhHình 2. Sự tương quan tuyến tính giữa nồng độ vàdiện tích đỉnh hesperidin.diosmin 17,379 7165011 110390,791 1,189 7,331Nhận xét: có tương quan tuyến tính giữanồng độ và diện tích đỉnh ...