Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Xác định kháng nguyên phản ứng miễn dịch của bệnh nhân ung thư gan

Luận văn được thực hiện nhằm mục đích tìm hiểu sự biểu hiện của các protein ở mô gan ung thư so với mô gan bình thường của bệnh nhân ung thư gan thông qua các điểm protein trên bản gel điện di hai chiều; nhận dạng được một số protein khác biệt đặc trưng giữa mô gan ung thư so với mô gan bình thường; xác định được protein có phản ứng miễn dịch (kháng nguyên ung thư gan) đặc hiệu với các kháng thể trong huyết tương bệnh nhân ung thư gan.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Xác định kháng nguyên phản ứng miễn dịch của bệnh nhân ung thư gan ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN --------  ------- LÊ LAN PHƢƠNGXÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN PHẢN ỨNG MIỄN DỊCH CỦA BỆNH NHÂN UNG THƢ GAN LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội - 2012 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN --------------------------------- Lê Lan PhươngXÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN PHẢN ỨNG MIỄN DỊCH CỦA BỆNH NHÂN UNG THƢ GANChuyên ngành: Sinh học thực nghiệmMã số: CH.60.42.30 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS. Trịnh Hồng Thái Hà Nội - 2012 LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS. TS. Trịnh Hồng Thái, người thầyđã tận tình chỉ bảo, hướng dẫn tôi trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu khoa họcvà thực hiện luận văn này. Tôi cũng xin trân trọng cảm ơn các thầy giáo, cô giáo trong Khoa Sinh học,Trường Đại học Khoa học Tự nhiên đã tận tình giảng dạy, dìu dắt tôi trong thời gianhọc tập tại Trường. Tôi xin được gửi lời cảm ơn chân thành tới các anh, chị học viên và các bạnsinh viên làm việc tại Phòng Proteomics và Sinh học cấu trúc thuộc Phòng thínghiệm Trọng điểm Công nghệ Enzyme và Protein, Trường Đại học Khoa học Tựnhiên đã tận tình chỉ bảo và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiệnluận văn tại Phòng. Trong quá trình thực hiện luận văn, tôi đã nhận được rất nhiều sự quan tâmgiúp đỡ của các cán bộ, nhân viên thuộc Khoa Tế bào - Giải phẫu bệnh, Bệnh việnK2, Tam Hiệp, Hà Nội. Tôi xin chân thành cảm ơn. Cuối cùng, tôi vô cùng biết ơn gia đình và bạn bè đã khích lệ, động viên,giúp đỡ tôi trong suốt thời gian qua. Luận văn được thực hiện với sự hỗ trợ kinh phí từ đề tài mã số KLEPT-09-02. Hà Nội, tháng 6 năm 2012 Học viên Lê Lan Phương MỤC LỤCBẢNG KÝ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT ........................................................... aDANH MỤC CÁC BẢNG..........................................................................................dDANH MỤC CÁC HÌNH ........................................................................................... eMỞ ĐẦU .....................................................................................................................1Chương 1 - TỔNG QUAN ..........................................................................................3 1.1. TỔNG QUAN VỀ UNG THƢ GAN ...............................................................3 1.1.1. Phân loại ung thư gan nguyên phát ...........................................................3 1.1.2. Nguyên nhân dẫn tới ung thư gan .............................................................4 1.1.3. Các giai đoạn của ung thư gan ..................................................................6 1.1.4. Các phương pháp chẩn đoán ung thư gan .................................................8 1.2. NGHIÊN CỨU CHỈ THỊ SINH HỌC ĐỐI VỚI UNG THƢ ..........................9 1.2.1. Chỉ thị sinh học đối với ung thư ................................................................9 1.2.2. Tiếp cận nghiên cứu chỉ thị sinh học đối với ung thư .............................10 1.2.3. Các loại chỉ thị sinh học đối với ung thư gan .........................................11 1.3. MIỄN DỊCH CHỐNG UNG THƢ ................................................................13 1.3.1. Đáp ứng miễn dịch chống ung thư ..........................................................13 1.3.2. Kháng nguyên ung thư ............................................................................13 1.3.3. Chỉ thị ung thư liên quan đến đáp ứng miễn dịch ...................................14 1.4. NGHIÊN CỨU PROTEOMICS MIỄN DỊCH UNG THƢ GAN .................15 1.4.1. Khái quát về proteomics và ứng dụng của proteomics ...........................15 1.4.2. Hệ protein gan người...............................................................................16 1.4.3. Nghiên cứu proteomics miễn dịch ung thư gan ......................................17Chương 2 - NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP ................................................24 2.1. NGUYÊN LIỆU .............................................................................................24 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu .............................................................................24 2.1.2. Hóa chất ..................................................................................................24 2.1.3. Thiết bị ....................................................................................................25 2.2. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU..................................................................25 2.2.1. Xử lý mẫu mô gan ...................................................................................25 2.2.2. Định lượng protein theo phương pháp Bradford ....................................27 2.2.3. Điện di hai chiều .....................................................................................27 2.2.4. Western Blot............................................................................................28 2.2.5. Phân tích hình ảnh bản gel điện di hai chiều, kết quả Western Blot ......29 2.2.6. Cắt và thủy phân spot trên bản ...